重组慢病毒载体pLKO-1-EGFP-puro的构建

• 作者: 刘景伟 吴少璞 宋波 杨靖 蔡晓辉 许予明 韩志强
• 来源期刊: 郑州大学学报(医学版)
• 学科: 医学
• 关键词: 神经系统遗传病 慢病毒载体 绿色荧光蛋白 嘌呤霉素抗性
• 年，卷（期）: 2010,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 926-928
• 分类号: R741.05
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-6825.2010.06.014

摘要

目的：构建具有绿色荧光蛋白（GFP）标记及嘌呤霉素（puro）抗性的重组慢病毒载体。方法：改建慢病毒载体质粒pLKO-1-puro的多克隆位点（MCS）,以质粒pEGFP-C3为模板扩增出CMV-EGFP并与pLKO-1-puro连接,形成重组的慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro,后者与包装质粒Δ8.2和包膜蛋白质粒VSV-G在293T细胞中进行包装,产生重组慢病毒颗粒,感染非洲绿猴肾细胞Vero细胞,观察GFP的表达。结果：成功改建了慢病毒载体质粒pLKO-1-puro并插入了CMV-EGFP,形成了新型慢病毒载体质粒pLKO-1-EGFP-puro。3质粒共转染293T细胞产生的重组慢病毒颗粒感染Vero细胞后高表达绿色荧光。结论：成功构建了高效的带GFP报告基因及嘌呤霉素抗性的慢病毒载体。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	许予明	郑州大学第一附属医院神经内科	209	955	14.0	21.0
2	宋波	郑州大学第一附属医院神经内科	88	465	11.0	18.0
3	吴少璞	郑州大学第一附属医院神经内科	7	36	3.0	6.0
4	韩志强	郑州大学第一附属医院神经内科	14	14	2.0	3.0
5	蔡晓辉	郑州大学第一附属医院神经内科	6	8	2.0	2.0
6	刘景伟	郑州大学第一附属医院神经内科	1	1	1.0	1.0
7	杨靖	郑州大学第一附属医院神经内科	17	40	4.0	6.0