荧光素酶标记的HBV细胞模型的建立

• 作者: 徐忠玉 梁声强 胡桂华 许小华 邹鹏程
• 来源期刊: 现代免疫学
• 学科: 医学
• 关键词: 乙型肝炎病毒 萤火虫荧光素酶 细胞模型
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 381-385
• 页数: 5页
• 分类号: R392.11
• 语种: 中文

摘要

建立萤火虫荧光素酶(Fluc)为报告基因标记的乙型肝炎病毒(HBV)体外感染的细胞模型.利用分子亚克隆技术,以pAAV/1.2HBV质粒为模板,PCR扩增带有反向重复序列(ITR)的1.2倍HBV基因组片段,反向插入真核表达载体pGL3-CP-Fluc中,构建Fluc标记的HBV基因组表达质粒pGL3-CP-Fluc HBV1.2,并将此质粒转染至Huh-7细胞中.全自动免疫分析仪进行HBsAg、HBeAg的定量检测,生物发光检测仪检测Fluc其在细胞的表达水平.成功构建了1.2倍HBV全基因真核表达载体,稳定转染Huh 7细胞后,质粒在细胞中高水平表达Fluc,并可以正常分泌HBsAg、HBeAg.重组质粒pGL3-CP-Fluc-HBV1.2能在Huh-7细胞中表达,其稳定转染的细胞可作为一种新型的HBV体外感染模型,为抗病毒药物研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐忠玉		45	108	6.0	9.0
2	梁声强		9	5	1.0	2.0
3	胡桂华		18	29	4.0	5.0
4	许小华		2	0	0.0	0.0
5	邹鹏程		2	2	1.0	1.0