幽门螺杆菌cag7-n基因克隆表达及其重组蛋白对BGC-823细胞生物学的影响

• 作者: 周海星 母润红
• 来源期刊: 北华大学学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: 幽门螺杆菌 cag7-n基因 克隆 增殖
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 生物科学?基础医学
• 页码范围: 463-467
• 页数: 5页
• 分类号: Q933
• 字数: 3641字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11713/j.issn.1009-4822.2014.04.009

摘要

目的：研究克隆幽门螺杆菌( Helicobacter pylori ) cag7-n 基因对 BGC-823细胞增殖和 IL-8分泌的影响.方法采用PCR技术从H. pylori基因组DNA中扩增cag7-n基因片段,构建重组质粒pET-28a-cag7-n,转化大肠杆菌BL21,经Western blot鉴定,纯化的蛋白作用于 BGC-823细胞,用 MTT 法检测蛋白对细胞增殖的影响.结果成功克隆cag7-n基因,经镍柱纯化后可获得纯度为98%的重组蛋白.纯化蛋白浓度在100,150,200μg/mL时,培养时间延长,细胞的增殖受到抑制；在相同的培养时间,细胞的增殖程度随蛋白浓度的增加而降低.结论成功克隆了cag7-n基因,并在大肠杆菌BL21中表达,经过镍柱纯化后得到纯度较高的蛋白,纯化透析后的蛋白与BGC-823细胞共培养,可诱导细胞因子IL-8在mRNA水平上的表达及其对BGC-823细胞增殖的影响.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	母润红	北华大学基础医学院	10	10	2.0	2.0