脂多糖通过PI3K／Akt／mTOR通路调控巨噬细胞自噬

• 作者: 丁红 刘梅兰 张睿 杜涛 陈慧 陈欣 黄海
• 来源期刊: 中国病理生理杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 脂多糖类 自噬 巨噬细胞 Akt
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 675-680
• 页数: 6页
• 分类号: R363
• 字数: 3809字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4718.2014.04.018

摘要

目的：观察脂多糖对巨噬细胞自噬活化的影响及相关信号通路的探讨。方法：体外培养巨噬细胞株RAW264．7，分为对照组、饥饿状态激活自噬组、单纯脂多糖（LPS）刺激组、LPS＋PI3K抑制剂（hVps34）组和LPS＋mTOR抑制剂（雷帕霉素）组。构建荧光真核表达载体pcDNA3．1-GFP-LC3，转染巨噬细胞，通过荧光显微镜观察各组细胞中自噬体形成情况。 qRT-PCR方法检测各组中与细胞自噬相关的Atg5、Atg7、LC3-II和Bnip3 mRNA表达水平的改变。利用Western blotting检测LC3-II、p-Akt和p-mTOR蛋白在各组中的表达情况，以评价LPS激活巨噬细胞自噬的分子通路。结果：成功构建稳定表达GFP-LC3的巨噬细胞，在荧光显微镜下可以观察到自噬在饥饿状态组、LPS＋hVps34组和LPS＋雷帕霉素组均有明显增强；qRT-PCR检测到Atg5、LC3-II和Bnip3 mRNA的表达在饥饿状态组、LPS＋hVps34组和LPS＋雷帕霉素组均有明显增强，而在LPS组中略微下降；Western blotting 检测发现p-Akt在饥饿状态组、LPS组和LPS＋雷帕霉素组中表达明显升高；p-mTOR在饥饿状态组、LPS＋hVps34组和LPS＋雷帕霉素组表达明显下降；LC3-II的表达在饥饿状态组、LPS＋hVps34组和LPS＋雷帕霉素组中表达要高于对照组和LPS组。结论：LPS参与巨噬细胞自噬的调控，其可能的信号通路为PI3K/Akt/mTOR通路，但仍存在其它有效的调控通路。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	黄海	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	102	606	14.0	19.0
2	陈慧	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	165	1057	19.0	28.0
3	张睿	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	85	513	13.0	20.0
4	丁红	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	29	289	10.0	16.0
5	刘梅兰	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	27	390	12.0	19.0
6	陈欣	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	31	377	13.0	19.0
7	杜涛	中山大学孙逸仙纪念医院妇产科	20	232	9.0	15.0