甲基化特异性多重连接探针扩增及甲基化特异性PCR诊断Prader-Willi综合征方法比较

• 作者: 宋红梅 施惠萍 王薇 赵时敏 邱正庆 魏珉
• 来源期刊: 协和医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: Prader-Will综合征 甲基化特异性PCR 甲基化特异性多重连接探针扩增
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 论 著
• 页码范围: 369-375
• 页数: 7页
• 分类号: R394-33
• 字数: 4817字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-9081.2014.04.003

摘要

目的：应用甲基化特异性 PCR （ methylation-specific PCR， MS-PCR ）和甲基化特异性多重连接探针扩增（methylation-specific multiplex ligation-dependent probe amplification， MS-MLPA）方法对Prader-Willi综合征（Prader-Willi syn-drome， PWS）进行诊断并比较两种方法的差异。方法回顾性研究2005年10月至2014年2月到北京协和医院就诊的患儿及正常对照共102例，男57例，女45例。其中正常对照16例；荧光原位杂交或高分辨染色体确诊PWS阳性对照2例；临床疑似PWS患儿84例。提取受试者外周血基因组DNA分别应用MS-PCR及MS-MLPA方法进行基因分析，对疑似患儿进行确诊和遗传类型分型，并计算两种方法的特异性、敏感性及准确度，应用卡方检验对两种方法进行比较。结果 MS-PCR结果示正常对照及阳性对照与其表型全部相符，84例疑似患儿中有39例提示为PWS，45例提示正常。 MS-MLPA结果示除正常对照外的86例受试者中，29例提示为父源缺失型PWS；9例提示为母源二体型PWS；47例提示为正常；1例因DNA过于陈旧未检出有效结果。对比两种方法检测结果，有2例MS-PCR结果显示为PWS，但MS-MLPA结果显示为正常，通过增加DNA用量重新进行MS-PCR检测后，除外PWS。结合临床表现，受试者中明确诊断PWS的患儿39例，非PWS者63例。 MS-PCR 方法共出现2例假阳性，假阳性率为3.17％（2/63）。 MS-PCR 方法敏感性100％，特异性96.83％，准确度98.03％； MS-MLPA方法敏感性97.43％，特异性100％，准确度99.02％。两种方法的敏感性、特异性及准确度差异无统计学意义（P均＞0.05）。结论 MS-PCR及MS-MLPA敏感性、特异性及准确度皆佳，均可用于PWS诊断， MS-MLPA可区分父源缺失型及母源二体型。 MS-PCR应保证DNA用量充足以避免假阳性出现。 MS-MLPA应使用新鲜提取的DNA，且实验条件要求更为严格。建议同时使用两种方法检测以获得准确结果。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王薇	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	38	172	6.0	12.0
2	魏珉	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	31	148	6.0	9.0
3	邱正庆	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	26	86	5.0	7.0
4	宋红梅	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	54	209	6.0	10.0
5	赵时敏	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	9	67	5.0	8.0
6	施惠萍	中国医学科学院北京协和医学院北京协和医院儿科	3	11	2.0	3.0