稀有鮈鲫 HMGR 基因全长克隆及雄鱼经五氯酚暴露基因表达的分析

• 作者: 刘堰 刘秋萍 张晓峥 李伟 毛思予 熊力 邓川 陈韵 高香
• 来源期刊: 环境科学
• 学科: 地球科学
• 关键词: 稀有鮈鲫 基因克隆 HMGR 五氯酚 表达分析
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 页码范围: 3183-3191
• 页数: 9页
• 分类号: X171.5
• 语种: 中文
• DOI: 10.13227/j.hjkx.2014.08.049

摘要

3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶 A 还原酶(3-hydroxy-3-methylglutaryl coenzyme A reductase,HMGR)是甲羟戊酸(mevalonic acid,MVA)途径中的第一个关键限速酶。克隆稀有鮈鲫 HMGR 基因全长,分析该基因在不同组织及雄鱼经不同浓度五氯酚(pentachlorophenol,PCP)暴露的表达差异,探索 PCP 对类固醇激素前体(胆固醇)合成水平基因转录调控的内分泌干扰机制。采用同源克隆策略及 cDNA 末端快速扩增技术( rapid-amplification of cDNA ends,RACE),从稀有鮈鲫肝脏中首次克隆得到3101碱基(bp)的 HMGR 基因 cDNA 全长,基因命名为 GrHMGR(GenBank accession No： KF885724)。 GrHMGR 编码884个氨基酸,系统发育树分析表明,GrHMGR 编码的蛋白与其他鱼类来源的 HMGR 氨基酸序列同源性较高。 Real-time PCR 分析表明GrHMGR 的表达有组织特异性,在大脑,性腺和肝脏中均有表达,性腺中表达量最高。稀有鮈鲫雄鱼经不同浓度 PCP 暴露后, GrHMGR 在大脑和性腺的表达随 PCP 浓度的增加显著下降,然而在肝脏组织中表达趋势有所不同。 HMGR 的表达下降会减少胆固醇的合成。说明 PCP 暴露会通过干扰稀有鮈鲫的胆固醇合成途径,进而对内分泌系统产生影响。