猪流行性腹泻病毒S蛋白部分抗原表位基因的原核表达及表达产物的免疫原性分析

• 作者: 刘永举 尹燕博 时超 朱丰龙 李昌静 毕玉敏 陈欣
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 猪流行性腹泻病毒 S基因 表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2014,（7）
• 页码范围: 752-757
• 页数: 6页
• 分类号: S852.659.6
• 语种: 中文

摘要

为获取具有免疫原性的猪流行性腹泻病毒S蛋白,并能有效研究其免疫原性,从山东省猪流行性腹泻病毒感染的某猪场病料中扩增S蛋白基因具有免疫原性的4个片段(Sa,Sb,Sc和Sd).将得到的目的片段导入原核表达载体pGEX-6P-1中,转化到BL21(DE3)感受态细胞中进行表达.将表达的蛋白免疫家兔以研究其免疫原性.结果表明,IPTG诱导融合蛋白表达条件的最佳诱导时间为8h,IPTG的最佳终浓度为1.0 mmol/L.SDS-PAGE和Western-blot分析表明,四个表达产物的分子质量分别约为61 ku(Sa)、46ku(Sb)、41 ku(Sc)、43 ku(Sd).经琼脂扩散试验测定,它们免疫后效价分别约为24(Sa)、25(Sb)、22(Sc)、24(Sd).该研究表明,表达的4段蛋白均具有免疫原性,这为后期亚单位疫苗的研制奠定了基础.