B结构域糖基化位点对凝血因子Ⅷ分泌和活性的影响

• 作者: 李大伟 李桂林 杲光伟 黄家语
• 来源期刊: 生物技术通讯
• 学科: 生物学
• 关键词: 重组凝血因子Ⅷ B结构域糖基化 定点突变
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 644-648
• 页数: 5页
• 分类号: Q78
• 字数: 3145字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1009-0002.2014.05.010

摘要

目的:研究B结构域糖基化位点对凝血因子Ⅷ分泌和活性的影响.方法:通过反向PCR技术在凝血因子ⅧA2和A3结构域之间插入B结构域的糖基化序列,PCR后进行重组连接、质粒转化、克隆筛选、质粒抽提等步骤,构建重组人凝血因子Ⅷ载体,然后再通过活性检测试剂盒检测胞外分泌因子Ⅷ活性,用ELISA(双抗体夹心法)检测胞外分泌因子Ⅷ总表达,用Western印迹检测重组因子Ⅷ在胞内的总表达.结果:B结构域糖基化点的增加使得因子Ⅷ的胞外相对活性最高提高了1倍.结论:糖基化位点的加入可以增强因子Ⅷ的胞外活性,如果适当增加糖基化位点的长度和数量(单个糖基化位点重复出现或多个糖基化位点连接),可以进一步提高因子Ⅷ的胞外表达和活性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	杲光伟	上海交通大学药学院	7	15	2.0	3.0
2	李大伟	上海交通大学药学院	36	82	6.0	7.0
3	李桂林	上海交通大学药学院	2	0	0.0	0.0
4	黄家语	上海交通大学药学院	2	0	0.0	0.0