经密码子优化的耐热纤维素酶在大肠杆菌中的表达

• 作者: 彭静静
• 来源期刊: 江苏农业学报
• 学科: 农学
• 关键词: 纤维素酶 mRNA 二级结构 优化 热激载体
• 年，卷（期）: 2014,（3）
• 所属期刊栏目: 遗传育种?耕作栽培?生理生化
• 页码范围: 497-502
• 页数: 6页
• 分类号: S634.3
• 字数: 3776字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1000-4440.2014.03.007

摘要

为了提高质粒pHsh-celD在大肠杆菌中的表达量,运用 mRNA 二级结构预测软件对pHsh-celD翻译起始区的二级结构进行优化,得到了具有最佳 mRNA二级结构及自由能的质粒pHsh-celD I。为了进一步提高纤维素酶的表达量,在不改变目的基因翻译的氨基酸序列的前提下,celD的N-端氨基酸尽可能地使用大肠杆菌同义密码子,定点突变后得到质粒pHsh-celD II。优化后质粒pHsh-celD II表达的纤维素酶活[(6.4±0.4) U/ml]是未优化[(4.1±0.3) U/ml]的1.6倍。 SDS-PAGE 结果显示,该重组酶的分子量为66000,与理论值相符。基于热激载体pHsh 的重组表达系统具有诱导表达简便、诱导方式廉价的优点,且重组酶热稳定性好,这对该酶的大规模发酵应用具有重要意义。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	彭静静	泰山学院生物与酿酒工程学院	17	41	3.0	5.0