小反刍兽疫病毒抗体间接ELISA检测方法的建立

• 作者: 李刚 李文超 梁琳 金红岩 隋修锟
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 小反刍兽疫病毒 H蛋白 间接酶联免疫吸附试验
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 页码范围: 569-575
• 页数: 7页
• 分类号: S852.659.5
• 语种: 中文

摘要

为建立一种能快速、特异、敏感地检测血清中小反刍兽疫病毒(PPRV)抗体的方法,通过RT-PCR方法扩增出1 830 bp的小反刍兽疫病毒的H基因,并将其克隆至原核表达载体pET-22b(+)中,进行H基因的重组表达.采用SDS-PAGE和Western-blot对重组蛋白进行鉴定及抗原性分析.用纯化的重组蛋白作为包被抗原,建立间接ELISA检测方法.通过矩阵法优化抗原最佳包被浓度、血清稀释度、最佳封闭剂、酶标二抗的最佳稀释度及孵育时间.结果显示,重组H蛋白(分子质量为68 ku)能与PPRV阳性血清发生特异性反应.用建立的间接ELISA与标准竞争ELISA试剂盒检测92份临床样品并进行比较,两者的符合率为94.11％.结果表明,本研究建立的间接ELISA可以用于临床PPRV抗体的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李刚	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	111	742	14.0	23.0
2	梁琳	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	13	9	2.0	2.0
3	金红岩	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	8	66	3.0	8.0
4	隋修锟	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	6	0	0.0	0.0
5	李文超	中国农业科学院北京畜牧兽医研究所	5	0	0.0	0.0