IPO8基因启动子的克隆及转录活性分析

• 作者: 刘建云 周小鸥 李卫东 熊建军 王庭 龚帧
• 来源期刊: 中南大学学报（医学版）
• 关键词: IPO8 启动子 报告基因
• 年，卷（期）: 2014,（8）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 764-768
• 页数: 5页
• 字数: 3363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11817/j.issn.1672-7347.2014.08.002

摘要

目的:克隆IPO8基因5'端非编码序列,探讨其转录活性.方法:应用cDNA 5'末端快速扩增(rapidamplification ofcDNA ends,5'RACE)方法定立IPO8基因转录起始点;在此基础上针对其5'端非编码区包括转录起始点在内的-3302 ～ +134区域分段进行PCR扩增,将产物克隆入荧光素酶表达载体pGL3-Basic.经酶切鉴定后,将重组质粒与内参质粒pRL-T K共转染人骨肉瘤细胞Saos-2,用双荧光素酶活性检测以确定其转录活性.结果:成功确定IPO8基因转录起始位点,酶切结果证实IPO8基因5'端非编码区6条续减片段正确插入到荧光素酶报告基因载体pGL3-Basic.重组质粒转染Saos-2细胞后检测到荧光素酶的高表达(P＜0.05).结论:成功构建具有转录活性的IPO8启动子片段,为进一步研究IPO8表达调控机制奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	熊建军	九江学院基础医学院药理教研室	21	28	4.0	4.0
2	龚帧	九江学院基础医学院药理教研室	21	58	4.0	6.0
3	周小鸥	九江学院基础医学院药理教研室	14	28	3.0	4.0
4	王庭	九江学院基础医学院药理教研室	14	25	3.0	4.0
5	刘建云		4	1	1.0	1.0
6	李卫东		7	23	2.0	4.0