菜用大黄 SRAP-PCR 反应体系的优化及验证

• 作者: 任文娟 姜立娜 蔡祖国 赵一鹏 郭小菲
• 来源期刊: 华北农学报
• 学科: 农学
• 关键词: 菜用大黄 SRAP-PCR 体系优化
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 页码范围: 105-110
• 页数: 6页
• 分类号: S644.9
• 字数: 4085字
• 语种: 中文

摘要

为建立菜用大黄最佳的SRAP反应体系，进一步对菜用大黄品种进行遗传多样性分析，以菜用大黄基因组DNA为模板，采用单因素与正交设计相结合的方法，对SRAP-PCR扩增体系中的模板DNA、Mg2＋、dNTPs、引物和Taq DNA聚合酶浓度5个因素进行优化，并确立菜用大黄SRAP-PCR的最佳体系。结果表明：菜用大黄各因素对反应体系影响大小依次为：引物浓度＞Mg2＋浓度＞dNTPs浓度＞Taq DNA聚合酶浓度＞DNA用量；最佳反应体系为：25μL反应体系中含10×PCR Buffer 2．50μL、模板DNA 30 ng、Mg2＋2．50 mmol/L、dNTPs 0．25 mmol/L、Taq DNA聚合酶0．04 U/μL、上下游引物各0．5μmol/L。用8个菜用大黄品种DNA样品对优化的反应体系进行验证，均获得了条带清晰且多态性较好的扩增图谱，证实了该体系的稳定性和可靠性，可用于菜用大黄的遗传多样性分析。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵一鹏	河南科技学院园艺园林学院	74	443	11.0	18.0
2	蔡祖国	河南科技学院园艺园林学院	68	303	10.0	12.0
3	姜立娜	河南科技学院园艺园林学院	34	73	5.0	7.0
4	任文娟	河南科技学院园艺园林学院	2	29	2.0	2.0
5	郭小菲	河南科技学院园艺园林学院	3	29	2.0	3.0