荷花SRAP-PCR反应体系的优化与确立

• 作者: 刘兆磊 孙祖霞 楼望淮 郭海林 陈发棣 陈素梅
• 来源期刊: 南京农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 荷花 SRAP-PCR 正交试验设计 反应体系优化
• 年，卷（期）: 2011,（6）
• 页码范围: 53-58
• 分类号: S682.32
• 字数: 4212字
• 语种: 中文

摘要

以荷花(Nelumbo nucifera Gaertn)品种‘新红’叶片为材料,采用L16(45)正交试验设计,对SRAP-PCR反应体系中的Mg2+、dNTPs、TaqDNA聚合酶、引物和模板DNA用量5因素进行了优化,并确立了适用于荷花SRAP-PCR的最佳反应体系.结果表明:荷花的SRAP-PCR最佳反应体系为:反应总体积10 μL,包含2.0 mmol ·L-1Mg2+、300 μmol·L-1dNTPs、0.5UTaqDNA聚合酶、4μmol·L-1上下游引物、50 ng DNA及10×PCR Buffer.各因素水平变化对反应体系影响由大到小依次为:TaqDNA聚合酶、Mg2+、引物、dNTPs、DNA.用48个荷花品种对优化的SRAP-PCR反应体系进行验证,均获得了条带清晰、多态性丰富的扩增图谱,证实了该体系的稳定性和适应性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭海林	南京农业大学园艺学院	29	814	17.0	28.0
3	陈发棣	南京农业大学园艺学院	260	4491	34.0	49.0
4	陈素梅	南京农业大学园艺学院	114	1676	23.0	32.0
5	刘兆磊	南京农业大学园艺学院	37	400	10.0	19.0
8	孙祖霞	南京农业大学园艺学院	1	21	1.0	1.0
9	楼望淮	南京农业大学园艺学院	2	22	1.0	2.0