进口竹荚鱼中单核细胞增生李斯特菌的鉴定及其鞭毛蛋白的原核表达

• 作者: 姜英辉 崔鹤 曾静 李正义 贾俊涛 魏海燕
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 竹荚鱼 单增李斯特菌 鉴定 鞭毛蛋白 表达
• 年，卷（期）: 2014,（6）
• 所属期刊栏目: 食品微生物
• 页码范围: 1160-1167
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.130501

摘要

[目的]对进口竹荚鱼中分离的一株病原菌S1-2进行鉴定,并在大肠杆菌中表达其鞭毛蛋白.[方法]采用全自动微生物鉴定仪和革兰氏阳性菌鉴定卡进行生理生化反应测试,利用iap基因实时荧光PCR特异性扩增检测病原菌.通过PCR技术扩增病原菌S1-2的鞭毛蛋白laA基因,克隆筛选和测序鉴定后,构建该基因的原核表达质粒pET22b-flaA,镍柱法纯化表达产物,通过免疫印迹鉴定其免疫原性.[结果]分离病原菌为革兰氏阳性菌,生理生化特征与单核细胞增生李斯特菌(Listeria monocytogenes)的相似性为99％,协同溶血实验在靠近金黄色葡萄球菌的接种端溶血增强.SDS-PAGE结果表明融合表达产物分子量约为32 kD,Western blot结果表明重组表达的鞭毛蛋白具有免疫原性.[结论]flaA基因的原核表达为制备单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体及其检测方法的建立奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	贾俊涛	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	42	172	7.0	11.0
2	姜英辉	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	22	73	5.0	5.0
3	魏海燕	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	33	88	5.0	7.0
4	崔鹤	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	19	67	5.0	7.0
5	李正义	山东出入境检验检疫局检验检疫技术中心	24	62	5.0	6.0
6	曾静	北京出入境检验检疫局检验检疫技术中心	35	131	7.0	8.0