D型沙眼衣原体质粒蛋白pgp3的克隆、表达、鉴定及其免疫原性初探

• 作者: 刘全忠 刘原君 孔杰 孙毅娜 李卓然 王敬 肖萌 赵乐然
• 来源期刊: 中华皮肤科杂志
• 关键词: 衣原体,沙眼 pgp3蛋白 重组融合蛋白质类 免疫法 疫苗,合成
• 年，卷（期）: 2014,（5）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 333-336
• 页数: 4页
• 字数: 3573字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.0412-4030.2014.05.008

摘要

目的 获得D型沙眼衣原体质粒蛋白pgp3基因及其蛋白,并鉴定其免疫原性.方法 PCR扩增目的基因,将其定向插入原核表达载体pGEX-6P-1中,连接产物转化入大肠埃希菌DH5α,提取质粒进行酶切、测序、PCR鉴定.再将重组质粒转化入大肠埃希菌BL21并诱导表达,Western印迹鉴定目的蛋白,谷胱甘肽巯基转移酶(GST)磁珠纯化pgp3-GST融合蛋白.用纯化后的蛋白免疫新西兰家兔,Western印迹检测抗体与pgp3蛋白的结合,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定抗体效价.结果 克隆目的基因序列长度为795 bp,与基因库中一致,Western印迹显示目的蛋白相对分子质量为54 000,并得到纯化蛋白.所得兔血清可识别pgp3蛋白,ELISA检测多克隆抗体效价达1∶25 600.结论 成功表达具有强免疫原性的pgp3-GST融合蛋白,为进一步研究奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘原君	天津医科大学总医院皮肤性病科	65	208	7.0	9.0
2	刘全忠	天津医科大学总医院皮肤性病科	170	703	11.0	17.0
3	孙毅娜	天津医科大学代谢病医院内分泌研究所	28	297	8.0	17.0
4	王敬	天津医科大学总医院皮肤性病科	13	41	5.0	5.0
5	李卓然	天津医科大学总医院皮肤性病科	5	15	3.0	3.0
6	孔杰	天津医科大学总医院皮肤性病科	8	15	3.0	3.0
7	赵乐然	天津医科大学总医院皮肤性病科	5	11	2.0	3.0
8	肖萌	天津医科大学总医院皮肤性病科	7	26	5.0	5.0