反枝苋花粉泛过敏原 profilin 基因的克隆表达、纯化及免疫学鉴定

• 作者: 刘志刚 肖小军 谢水祥 马莉 龚祥 龚苗
• 来源期刊: 南昌大学学报（医学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 反枝苋花粉 抑制蛋白 基因表达 纯化
• 年，卷（期）: 2014,（12）
• 所属期刊栏目: 【基础医学】
• 页码范围: 4-8
• 页数: 5页
• 分类号: R392.8
• 字数: 3741字
• 语种: 中文

摘要

目的：克隆表达反枝苋花粉中泛变应原肌动蛋白抑制蛋白（profilin），并鉴定其免疫学活性。方法利用RT-PCR 结合 RACE 技术克隆反枝苋花粉泛变应原 profilin 的全长基因，并进行序列分析。设计带有酶切位点的特异性引物，采用 RT-PCR 获得整个反枝苋花粉 profilin 的开放阅读框，将其与 pET28a 载体连接并转化大肠杆菌BL21（DE3）进行诱导表达，Ni2＋亲和层析柱纯化重组蛋白，采用 Western-blot 检测其 IgE 结合活性。结果cDNA核苷酸测序表明反枝苋花粉 profilin 的全长基因由675个碱基组成，开放阅读框为399 bp，编码131个氨基酸。重组反枝苋花粉 profilin 在大肠杆菌中可溶性表达，进一步经 Western-blot 检测具有良好的 IgE 结合活性。结论成功地克隆和表达了反枝苋花粉 profilin，并具有良好的 IgE 应答免疫活性。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘志刚	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	324	1724	17.0	23.0
2	谢水祥	赣南医学院病原生物学教研室	41	277	10.0	15.0
3	肖小军	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	27	49	4.0	4.0
4	龚苗	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	3	4	2.0	2.0
5	马莉	深圳大学过敏反应与免疫学研究所	4	12	2.0	3.0