亲磷脂酸磷脂酶 A1基因沉默降低 MIN6细胞胰岛素分泌水平

• 作者: 刘永明 史云龙 朱华 李红岩 杨易 苏何玲 莫之婧 黄海霞
• 来源期刊: 实用医学杂志
• 关键词: 亲磷脂酸磷脂酶 A1 siRNA 基因沉默 胰岛素分泌
• 年，卷（期）: 2014,（18）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 2872-2875
• 页数: 4页
• 字数: 3483字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1006-5725.2014.18.002

摘要

目的：探讨亲磷脂酸磷脂酶 A1（PA-PLA1）基因沉默对小鼠分泌胰岛素细胞 MIN6分泌功能的影响。方法：根据 GenBank 中小鼠 PA-PLA1基因 mRNA 序列构建 siRNA 表达载体（pGPU6-PA-PLA1）并转染MIN6，实时荧光定量 PCR 和 Western blot 筛选有效干扰载体。将获得的有效干扰载体转染 MIN6细胞48 h后进行葡萄糖刺激实验，检测其胰岛素分泌的变化。结果：酶切及测序证实成功构建了4个靶向 PA-PLA1的 siRNA 表达载体。实时荧光定量 PCR 和 Western blot 分析显示 siRNA 表达载体 pGPU6-PA-PLA1-1885具有较高的干扰效率，其转染的 MIN6细胞 PA-PLA1 mRNA 水平降至对照组的46．3％，PA-PLA1蛋白水平降至对照组的33．9％，同时胰岛素分泌水平降至对照组的65．0％（P ＜0．05）。结论：PA-PLA1基因沉默可降低MIN6的胰岛素分泌水平。