双亲和柱分离纯化高纯度抗体Fab酶切片段

• 作者: 戚大梁 易维京 王强
• 来源期刊: 国际检验医学杂志
• 关键词: 亲和层析 木瓜蛋白酶 抗原结合片段
• 年，卷（期）: 2014,（4）
• 所属期刊栏目: 检验技术与方法
• 页码范围: 460-462
• 页数: 3页
• 字数: 3443字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1673-4130.2014.04.033

摘要

目的 建立利用抗原亲和柱及蛋白G亲和柱纯化抗体木瓜蛋白酶酶切产物中高纯度Fab片段的方法.方法 以抗体对应的抗原蛋白与NHS-activated Sepharose 4 Fast Flow活化偶联填料偶联制备抗原免疫亲和层析柱,将抗体木瓜蛋白酶酶切产物分剐通过蛋白G柱及抗原亲和柱制备抗体的Fab片段.通过SDSPAGE电泳、ELISA测定及临床类风湿因子阳性血清的干扰实验鉴定其制备效果.结果 抗体木瓜蛋白酶酶切产物分别通过蛋白G柱及抗原亲和柱后可以依次去除抗体Fc片段及未切开的抗体、木瓜蛋白酶及失活的Fab抗体片段,最终获得高纯度、高活性的Fab抗体片段.SDS-PAGE电泳、ELISA测定抗体Fc段被完全去除,双抗夹心ELISA检测能消除类风湿因子阳性血清导致的假阳性.结论 成功建立了双亲和柱分离纯化抗体Fab片段的方法,该方法适用于快速、高质量、大规模制备Fab抗体片段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王强	中国人民解放军第八二医院一四九临床部	176	583	12.0	16.0
2	戚大梁	中国人民解放军第八二医院一四九临床部	4	7	2.0	2.0
3	易维京	中国人民解放军第八二医院一四九临床部	1	1	1.0	1.0