MIA2慢病毒表达载体构建及其表达活性的研究

• 作者: 何芳 李鹏 杨少奇 杨花 胡建国
• 来源期刊: 重庆医学
• 学科: 医学
• 关键词: 肝肿瘤 细胞增殖 黑色素瘤抑制蛋白2 HepG2细胞
• 年，卷（期）: 2014,（32）
• 所属期刊栏目: 论著?基础研究
• 页码范围: 4288-4290
• 页数: 3页
• 分类号: R575.2
• 字数: 3035字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1671-8348.2014.32.005

摘要

目的：构建黑色素瘤抑制蛋白2（MIA2）慢病毒表达载体，并将其通过脂质体转染到HepG2细胞中，观察转染前后MIA2表达变化及其对细胞凋亡的影响。方法以pDONR223‐MIA2为模板，PCR扩增MIA2，构建pLVX‐IRES‐ZsGreen1‐MIA2慢病毒表达载体，体外瞬时转染肝癌细胞HepG2，荧光显微镜下观察MIA2的表达情况，用实时荧光定量PCR（RT‐PCR）检测HepG2细胞中MIA2mRNA的表达情况，噻唑蓝（MTT）法和克隆形成实验检测细胞增殖的情况。结果成功构建pLVX‐IRES‐ZsGreen1‐MIA2慢病毒表达载体；RT‐PCR结果显示，阴性对照组与实验组细胞MIA2mRNA表达水平差异有统计学意义（P＜0．05）；MTT检测发现，实验组细胞增殖数目较阴性对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0．05）；此外，实验组的克隆形成数和细胞迁移数均较阴性对照组明显减少，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论pIRES2‐ZsGreen1‐MIA2可显著下调MIA2的表达水平进而抑制肝癌细胞HepG2的体外增殖及迁移能力。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李鹏		39	219	9.0	13.0
5	杨少奇	宁夏医科大学总医院消化内科	79	302	10.0	13.0
6	胡建国	宁夏医科大学总医院消化内科	26	134	7.0	10.0
7	何芳	宁夏医科大学总医院消化内科	18	41	4.0	5.0