产青蒿二烯的人工酵母细胞的构建及发酵优化

• 作者: 丁明珠 元英进 郭睿
• 来源期刊: 化工学报
• 关键词: 合成生物学 青蒿二烯 酿酒酵母 基因工程 发酵
• 年，卷（期）: 2015,（1）
• 所属期刊栏目: 生物化学工程与技术
• 页码范围: 378-385
• 页数: 8页
• 分类号: Q819
• 语种: 中文
• DOI: 10.11949/j.issn.0438-1157.20140956

摘要

为了异源合成抗疟疾药物青蒿素重要前体青蒿二烯，以酿酒酵母作为底盘细胞，利用基因工程手段构建功能人工酵母细胞。为提高基因拷贝数，并增加重组菌株基因型的稳定性，选择酵母基因组中多拷贝位点 Delta 为整合点，实现酿酒酵母内源基因tHMGR和ERG20的过表达以及外源基因ADS的整合。过表达tHMGR和ERG20基因增加了酵母体内半萜类物质共同前体法尼基焦磷酸FPP的积累量；而导入外源基因ADS，实现了酵母生产青蒿二烯。经过摇瓶发酵优化实验，人工酵母菌株青蒿二烯产量为225.3 mg·L?1；为了进一步提高青蒿二烯产量，经过发酵过程优化和补料策略，人工酵母菌株在5 L发酵罐中青蒿二烯产量达到1.05 g·L?1。