烟曲霉果胶裂解酶A重组蛋白的原核表达及抗原性分析

• 作者: 刘倩 史利宁 商秀娟 张国勇 李伟 李芳秋 胡毓安
• 来源期刊: 临床检验杂志
• 学科: 生物学
• 关键词: 烟曲霉 果胶酶A 原核表达
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 临床实验研究
• 页码范围: 108-110
• 页数: 3页
• 分类号: Q78
• 字数: 2772字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13602/j.cnki.jcls.2015.02.07

摘要

目的 制备烟曲霉果胶裂解酶A(pectate lyase A,PlyA)重组蛋白质并鉴定其抗原性.方法 对编码烟曲霉plyA基因的DNA序列进行优化和人工合成,序列分析验证,然后连接至表达载体pET-28a(+),并转化大肠埃希菌(E.coli) BL21(DE3).用异丙基硫代半乳糖苷(IPTG)诱导重组蛋白质表达,SDS-PAGE电泳分析重组蛋白质,并用Talon亲和层析柱纯化,western blot分析重组蛋白质与抗组氨酸标签蛋白(His-tag)单克隆抗体和侵袭性曲霉病患者血清中相应抗体的反应性.结果 克隆出经过修饰改良的、适用于原核细胞表达的烟曲霉plyA基因的DNA序列;获得相对分子量约35 300的PlyA重组蛋白质;western blot结果显示该蛋白质可被抗His-tag抗体识别,并与曲霉病患者血清中抗体发生特异性免疫反应.结论 成功表达烟曲霉PlyA重组蛋白质,初步证明该蛋白质的抗原性良好.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李伟	南京军区南京总医院临床中心实验科	28	163	7.0	12.0
2	李芳秋	南京军区南京总医院临床中心实验科	93	590	11.0	20.0
3	史利宁	南京军区南京总医院临床中心实验科	75	319	10.0	15.0
4	胡毓安	南京军区南京总医院临床中心实验科	33	316	10.0	17.0
5	刘倩	南京师范大学生命科学学院	9	33	3.0	5.0
9	张国勇	南京师范大学生命科学学院	7	20	3.0	4.0