残缘璃眼蜱subolesin基因的原核表达及表达产物的反应原性分析

• 作者: 任巧云 李凯 王素艳 王芳芳 田占成 罗金 袁小松 谢俊仁 陈泽
• 来源期刊: 中国兽医科学
• 学科: 农学
• 关键词: 残缘璃眼蜱 subolesin基因 原核表达 反应原性
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 331-338
• 页数: 8页
• 分类号: S852.746
• 语种: 中文

摘要

为研究残缘璃眼蜱subolesin基因的生物学特性以及寻找新的抗蜱和蜱传病疫苗候选抗原,根据GenBank上登录的小亚璃眼蜱subolesin基因核苷酸序列设计特异性引物,以残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱的饥饿成蜱cDNA为模板,扩增出subolesin基因的完整阅读框(ORF).将残缘璃眼蜱subolesin基因的PCR产物经EcoRI+NotI双酶切后连接至表达载体pGEX-4T-1,把重组质粒pGEX-4T-1-subolesin导入感受态细胞BL21 (DE3)中,在37℃、1 mmol/L IPTG条件下诱导表达.利用SDS-PAGE分析subolesin基因的体外表达特征;用Western-blot分析Subolesin蛋白的反应原性.结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱subolesin基因的ORF长度分别为492、492、486 bp,分别编码163、163、161个氨基酸.subolesin基因序列和推导的氨基酸序列的比对结果显示,残缘璃眼蜱、亚洲璃眼蜱、微小牛蜱与参考的小亚璃眼蜱的核苷酸序列同源性分别为98％、98％、89％,氨基酸序列同源性分别为98％、99％、93％.SDS-PAGE和Western-blot结果显示,重组残缘璃眼蜱Subolesin蛋白的分子质量为45 ku,纯化的subolesin重组抗原可与抗残缘璃眼蜱全蜱血清、残缘璃眼蜱唾液腺、卵巢血清有较强的反应原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王素艳	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	970	10.0	12.0
2	任巧云	中国农业科学院兰州兽医研究所	12	27	2.0	5.0
3	王芳芳	中国农业科学院兰州兽医研究所	11	6	1.0	2.0
4	李凯	中国农业科学院兰州兽医研究所	20	44	4.0	6.0
5	谢俊仁	中国农业科学院兰州兽医研究所	9	11	1.0	3.0
6	田占成	中国农业科学院兰州兽医研究所	15	42	2.0	6.0
7	罗金	中国农业科学院兰州兽医研究所	5	0	0.0	0.0
8	袁小松	中国农业科学院兰州兽医研究所	3	0	0.0	0.0
9	陈泽	中国农业科学院兰州兽医研究所	10	27	2.0	5.0