大豆 HSP17.4Ⅲ基因克隆及植物表达载体的构建?

• 作者: 刘婷婷 姚丹 潘丽丹 王丕武 王丹 王冬冬
• 来源期刊: 吉林农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 大豆 子房 基因 热激蛋白 超表达载体 RNAi表达载体
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 页码范围: 643-648
• 页数: 6页
• 分类号: S336|Q78
• 语种: 中文
• DOI: 10.13327/j.jjlau.2015.2609

摘要

大豆子房作为成熟花器官的重要组成部分，发育初期对子房内细胞分裂数有着重要的影响，可能直接影响子粒发育以及品质形成，因此对子房特异表达基因的研究将可能为多粒荚形成的分子基础提供依据。该研究以大豆多粒荚突变体为试验材料，选取上调表达差异显著的 HSP17?4Ⅲ基因为目标基因，通过RT－PCR扩增HSP17?4Ⅲ基因全长CDS序列，编码序列与NCBI中HSP17?4Ⅲ基因序列相似性为99％。双酶切连入表达载体pCAMBIA3300，构建超表达载体；亚克隆法扩增该基因246 bp大小的核心保守序列，依次将其正义片段、功能性间隔序列Intron－SSR和反义片段双酶切连接到中间载体pBluescript SK，再利用BamHⅠ和SacⅠ双酶切将其整个干扰元件连入表达载体pCPB上，构建RNA干扰植物表达载体。质粒PCR、酶切鉴定以及测序结果表明，成功构建了超表达载体pCPB－QC3和RNA干扰植物表达载体pCPB－ZSF－RNAi，为研究HSP17?4Ⅲ蛋白在大豆子房中的功能奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	姚丹	吉林农业大学农学院	88	473	12.0	16.0
2	王丕武	吉林农业大学农学院	249	1853	20.0	32.0
3	王丹	吉林农业大学农学院	78	188	7.0	10.0
4	刘婷婷	吉林农业大学农学院	78	491	12.0	18.0
5	王冬冬	吉林农业大学农学院	2	1	1.0	1.0
6	潘丽丹	吉林农业大学农学院	3	4	1.0	1.0