HP-PRRSV HuN4株ORF7原核表达载体的构建及表达

• 作者: 刘洪斌 孙心 李琳 李静
• 来源期刊: 中国动物保健
• 关键词: HP- PRRSV 原核表达 N蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 学术研究
• 页码范围: 66-68,70
• 页数: 4页
• 字数: 2595字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1008-4754.2015.06.039

摘要

目的：构建HP- PRRSV HuN4株ORF7原核表达载体，诱导表达重组N蛋白。方法：本实验选取HP- PRRSV经典株HuN4株，根据ORF7序列(EF635006)及原核表达载体PGEX-6p-1中的多克隆位点设计引物，进行ORF7基因的克隆和原核表达载体的构建；将重组载体在原核表达体系中进行表达，通过SDS- PAGE电泳鉴定蛋白表达情况。结果：以HP- PRRSV HuN4株cDNA为模板，PCR扩增出约为372 bp片段，经插入原核表达载体PGEX-6p-1，构建原核表达质粒PGEX- ORF7,鉴定后经1 mmol/L IPTG在37℃下诱导，3 h后蛋白表达量最大；通过SDS- PAGE鉴定蛋白表达成功。结论：成功构建了HP- PRRS HuN4株ORF7基因原核表达载体，以及进一步表达重组融合N蛋白；为进一步研究病毒的结构及功能奠定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李静		19	8	2.0	2.0
2	李琳		6	2	1.0	1.0
3	孙心		18	8	2.0	2.0
4	刘洪斌		13	24	3.0	4.0