布鲁菌 bp26基因的原核表达及间接 ELISA方法的临床初步应用

• 作者: 刘雪梅 李天惠 李鲁平 谷海峰 郭港
• 来源期刊: 微生物学杂志
• 关键词: BP26重组蛋白 间接ELISA 布鲁菌
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 页码范围: 43-47
• 页数: 5页
• 字数: 3363字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1005-7021.2015.03.007

摘要

构建诊断人布氏菌病的优势抗原BP26原核表达载体，并建立以该蛋白作为包被抗原的间接ELISA方法。人工合成bp26基因片段，构建原核表达载体pET30a-bp26，并转化入大肠埃希菌BL21（DE3）中，IPTG诱导表达，Ni柱亲和纯化BP26重组蛋白，间接ELISA检测其抗原活性，并优化间接ELISA方法的各个参数，检测临床大量样本，对该方法性能进行评价。 PCR鉴定及DNA测序证实pET30a-bp26重组质粒构建成功，并在0．8 mmol／L IPTG 20℃过夜诱导的条件下大量表达，经亲和纯化获得高纯度的可溶性BP26重组蛋白，间接ELISA结果显示该重组蛋白具有抗原活性，优化参数后，该方法的敏感度为70．00％，特异性为94．74％。成功获得高抗原活性的原核表达可溶性BP26重组蛋白，并建立用于临床特异性诊断人类布病的间接ELISA方法。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭港	沈阳市第六人民医院检验科	9	45	3.0	6.0
2	李鲁平	沈阳市第六人民医院检验科	16	77	6.0	8.0
3	谷海峰	沈阳市第六人民医院检验科	7	32	2.0	5.0
4	刘雪梅	沈阳市第六人民医院检验科	2	0	0.0	0.0
5	李天惠	沈阳市第六人民医院检验科	1	0	0.0	0.0