鸭Toll样受体3实时荧光定量PCR检测方法的建立

• 作者: 刘光清 孟春春 宋凯杰 张淼涛 李丹丹 李传峰 陈宗艳 黄云秀
• 来源期刊: 中国动物传染病学报
• 学科: 农学
• 关键词: TLR3 荧光定量PCR 北京鸭
• 年，卷（期）: 2015,（3）
• 所属期刊栏目: 其他
• 页码范围: 42-49
• 页数: 8页
• 分类号: S852.42
• 字数: 5039字
• 语种: 中文

摘要

根据鸭Toll样受体3(Toll-like receptor 3,TLR3)的基因序列保守区设计特异性引物,以鸭β肌动蛋白(β-actin) mRNA为内参,建立了一种检测鸭TLR3 mRNA表达水平的实时荧光定量PCR方法.该方法的标准曲线在1×102~1×108 copies/μL范围内,具有良好的线性关系,相关系数和扩增效率均在0.9以上.熔解曲线显示,PCR产物为单峰,具有高度扩增特异性.重复性结果表明,该方法组内、组间变异系数均小于3 %,最低检测浓度达100 copies/μL.利用该方法检测了TLR3在鸭组织器官中的表达和分布情况,结果表明,TLR3在鸭子的各种组织或器官中均有分布,其中以气管的表达水平最高,而在脾脏的表达水平最低.该检测方法的成功建立为研究TLR3在鸭天然免疫过程中的生物学功能提供了良好的技术手段.