柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因CP8的克隆与表达分析

• 作者: 刘朝良 李胜 王芳 钱岑
• 来源期刊: 安徽农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 柞蚕 CP8基因 克隆 原核表达 RT-qPCR
• 年，卷（期）: 2015,（5）
• 所属期刊栏目: 生物学
• 页码范围: 780-785
• 分类号: S885.1
• 语种: 中文
• DOI: 10.13610/j.cnki.1672-352x.20150825.010

摘要

蛋白酶抑制剂在昆虫免疫中发挥着重要的作用.首次克隆获得了一个柞蚕真菌蛋白酶抑制剂基因ApCP8的开放阅读框(ORF)序列.该基因的ORF序列全长318 bp,编码了一个由106个氨基酸组成的蛋白(包括19个氨基酸的信号肽).预测蛋白的等电点和分子量大小分别为9.05和11.3 kD.序列分析和进化树构建结果表明,ApCP8与已知的几种昆虫相应蛋白具有很高的同源性,且与印度柞蚕的CP8聚在同一进化分支上.实时荧光定量PCR (RT-qPCR)结果表明,ApCP8主要在柞蚕脂肪体中高表达;且ApCP8在被白僵菌诱导的初期高表达,推测其可能参与了柞蚕抗真菌的免疫反应.同时,利用pET-32a(+)载体对ApCP8进行了原核表达,并对重组表达蛋白进行了纯化和抗体制备.本研究将为进一步探索ApCP8的抗真菌功能奠定前期基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	刘朝良	安徽农业大学生命科学学院	93	675	15.0	20.0
2	钱岑	安徽农业大学生命科学学院	13	30	4.0	5.0
3	王芳	安徽农业大学生命科学学院	35	57	4.0	5.0
4	李胜	安徽农业大学生命科学学院	4	5	2.0	2.0