目的:构建人CD63真核表达质粒,观察其在人舌鳞癌细胞TCA8113中的表达与定位。方法提取TCA8113细胞总RNA,RT-PCR方法扩增CD63全长基因序列,亚克隆至pcDNA3.1真核表达质粒中,构建pcDNA3.1-CD63表达质粒,转化E.coli DH5α,筛选阳性克隆,酶切及测序鉴定正确后,将重组质粒转染TCA8113细胞,Western blot检测蛋白表达,间接免疫荧光方法观察CD63蛋白在TCA8113细胞中的表达与定位。结果成功构建了pcDNA3.1-CD63真核表达质粒, Western bolt结果检测到外源CD63高表达,间接免疫荧光结果表明CD63融合蛋白与内源CD63蛋白定位相似,均表达于细胞膜。结论外源CD63融合蛋白能在TCA8113中高表达并定位于细胞膜。