灰色链霉菌中乙酰木聚糖酯酶基因的克隆、表达及酶学性质研究

• 作者: 刘伟娜 厚凌宇 梁迪 玉王宁 王晓宇 谢响明 金一
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 灰色链霉菌 乙酰木聚糖酯酶 原核表达 纯化 酶学性质
• 年，卷（期）: 2015,（2）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 153-159
• 页数: 7页
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.02.023

摘要

根据GenBank数据库中已报道的灰色链霉菌（Streptomyces griseus）全基因组序列，分析得到假定的乙酰木聚糖酯酶基因序列并设计引物；利用分子克隆的方法得到该菌株基因组中乙酰木聚糖酯酶基因，并构建原核表达载体pET28a-Sgraxe，经IPTG诱导表达重组SgrAxe，Ni-NTA亲和层析法纯化该蛋白。结果显示，克隆得到乙酰木聚糖酯酶基因axe，其序列全长1008 bp，编码336个氨基酸。SDS-PAGE检测带有pET28a-Sgraxe转化菌株诱导表达产物相对分子量约为37 kD，与理论值相符。纯化的重组SgrAxe酶学性质表明，该酶最适反应温度为50℃，最适pH8.0，热稳定性较强，pH作用范围广；金属离子对酶均表现为抑制作用，尤其是Zn2+严重抑制酶活力；重组酶特征的分析揭示了其在工业中潜在的应用价值。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	谢响明	北京林业大学生物科学与技术学院	66	635	13.0	22.0
2	刘伟娜	北京林业大学生物科学与技术学院	4	37	2.0	4.0
3	金一	北京林业大学生物科学与技术学院	12	62	4.0	7.0
4	厚凌宇	北京林业大学生物科学与技术学院	5	14	2.0	3.0
5	玉王宁	北京林业大学生物科学与技术学院	3	31	1.0	3.0
6	王晓宇	北京林业大学生物科学与技术学院	9	47	3.0	6.0
7	梁迪	北京林业大学生物科学与技术学院	1	1	1.0	1.0