DNA结合蛋白DbpA影响DNA聚合酶性能的研究

• 作者: 曹淑中 裘丽珍
• 来源期刊: 复旦学报（自然科学版）
• 学科: 生物学
• 关键词: Pfu DNA聚合酶 DbpA 延伸速度
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 生命科学
• 页码范围: 469-477
• 分类号: Q816
• 语种: 中文

摘要

DNA聚合酶是催化DNA合成的酶,在体内和体外都具有重要的作用.在体内DNA聚合酶参与DNA的复制、损伤修复等,在体外DNA聚合酶是现代分子生物学重要的工具酶.Pfu DNA聚合酶因具有高保真性而被广泛使用,但延伸速度慢,提高其延伸速度将使其应用更加广泛.DbpA是古生菌Sulfolobus solfataricus细胞内含量丰富的非特异性双链DNA结合蛋白,分子质量8 ku.本研究通过引物重叠延伸的方法得到密码子优化的DbpA基因,并构建得到Pfu-DbpA基因.结果表明:融合有DbpA蛋白的Pfu DNA聚合酶(Pfu-DbpADNA聚合酶)自身的热稳定性不受影响,而延伸速度得到了提高;同时具有更高的耐盐性,说明具有更高的持续合成能力,并且能够适应更广泛的缓冲液体系.应用Pfu-DbpA DNA聚合酶扩增λDNA不同长度的片段,结果显示其比Pfu DNA聚合酶具有更好的应用效果.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	裘丽珍	复旦大学生命科学学院	2	5	1.0	2.0
2	曹淑中	复旦大学生命科学学院	1	1	1.0	1.0