人LIGHT-Fc融合蛋白在毕赤酵母中的表达及鉴定

• 作者: 任华 江文正 赵勇 郝文丽
• 来源期刊: 中国生物制品学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: LIGHT 毕赤酵母 基因表达
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 791-794
• 分类号: Q786|R392-33
• 语种: 中文

摘要

目的 利用酵母表达系统制备人LIGHT-Fc融合蛋白.方法 利用基因工程方法构建含人LIGHT胞外段基因和人IgG4 Fc基因的重组质粒pPIC9K-LIGHT-Fc,经Sal Ⅰ线性化后电转化感受态酵母菌GS115,PCR鉴定重组转化子.将阳性重组转化子经甲醇诱导表达后,RT-PCR法检测目的基因的转录水平,SDS-PAGE及Western blot法进行表达产物的鉴定.结果 表达质粒pPIC9K-LIGHT-Fc经酶切及测序鉴定,证明构建正确.10个重组子均为Mut+型阳性转化子,经甲醇诱导后可扩增出特异性目的基因片段.表达的重组LIGHT-Fc融合蛋白相对分子质量约45 000,可与鼠抗人LIGHT多克隆抗体发生特异性结合.结论 人LIGHT-Fc融合蛋白在毕赤酵母中已成功获得了表达,为进一步开展其生物学功能的研究奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	赵勇		6	8	2.0	2.0
2	任华	华东师范大学生命科学学院	9	55	4.0	7.0
3	郝文丽	华东师范大学生命科学学院	4	4	1.0	1.0
4	江文正	华东师范大学生命科学学院	14	17	2.0	3.0