重组赖氨酸内肽酶构建表达及活性方法研究

• 作者: 付志成 范开 马妍
• 来源期刊: 重庆理工大学学报（自然科学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 基因重组 表达 胰岛素原 活性
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 药学与医学
• 页码范围: 53-59,106
• 页数: 8页
• 分类号: R394
• 字数: 6088字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3969/j.issn.1674-8425(z).2015.04.011

摘要

设计了重组赖氨酸内肽酶蛋白氨基酸序列，根据 P. Pastoris 酵母密码子偏爱性原则设计 cDNA 序列，其中 TGA 和 TAA 为两个终止密码子序列，并在序列5’端和3’端分别设计Xho I（CTCGAG）和 Not I（GCGGCCGC）限制性酶切位点，将其重组到原核表达质粒 pMD19-T中，得到 pMD19-T-Lys-C，并在毕赤酵母中获得表达。应用 SDS-PAGE 电泳及免疫斑点法检测其表达，RP-GPLC 分析重组赖氨酸内肽酶可以特异性切除赖氨酸基团 C 末端的氨基酸残基，证明该重组的赖氨酸内肽酶可替代 Lysyl Endopeptidase 应用于胰岛素的制备工艺中。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	范开	重庆理工大学药学与生物工程学院	18	38	3.0	5.0
2	马妍	重庆理工大学药学与生物工程学院	3	4	1.0	2.0
3	付志成		1	1	1.0	1.0