VRTN Promoter-hsp68-LacZ表达载体的构建与鉴定

• 作者: 张慧 张震 徐盼 段艳宇
• 来源期刊: 江西农业大学学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 通路克隆 VRTN基因 热休克蛋白 表达载体
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 生物技术与工程
• 页码范围: 1080-1085
• 页数: 6页
• 分类号: Q785
• 字数: 4232字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13836/j.jjau.2015165

摘要

利用β－半乳糖苷酶（ LacZ）报告基因对与猪脊椎发育相关的VRTN基因调节突变区进行研究和鉴别。使用通路克隆技术构建与VRTN基因的启动子区与热休克蛋白（ hsp68）启动子及LacZ相连的报告载体，将其转染人肾上皮细胞系（ HEK293T细胞），并将载体线性化后整合入HEK293T细胞基因组中进行上述表达质粒整合效率的评估。结果表明：利用通路克隆技术构建真核表达质粒快速准确；在脂质体介导下转染HEK293T细胞后，将细胞置于42℃热休克染色后检测转染效率60％左右；线性化后转染HEK293T细胞加新霉素G418筛选后可得到稳定遗传的整合有质粒的细胞。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	徐盼	江西农业大学省部共建猪遗传改良与养殖技术国家重点实验室	3	7	2.0	2.0
2	张震	江西农业大学省部共建猪遗传改良与养殖技术国家重点实验室	6	12	3.0	3.0
3	段艳宇	江西农业大学省部共建猪遗传改良与养殖技术国家重点实验室	7	12	3.0	3.0
4	张慧	江西农业大学省部共建猪遗传改良与养殖技术国家重点实验室	8	67	4.0	8.0