Cav1.2通道CT1片断突变体的质粒构建和蛋白表达

• 作者: 封瑞 朱彤 毛楠 王红梅 赵美眯 郝丽英 雷明
• 来源期刊: 中国医科大学学报
• 学科: 医学
• 关键词: 融合蛋白 CT1 突变体
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 837-839,843
• 页数: 4页
• 分类号: R966
• 字数: 2303字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建心肌Cav1.2通道CT1片段及其突变体与谷胱甘肽转移酶(GST)重组的融合蛋白原核表达载体,并进行蛋白表达和纯化.方法 以豚鼠Cav1.2通道CT1质粒(pGEX?6p?3/CT1)为模板,采用定点突变技术构建CT1 T1603A和CT1 T1603D两种突变体质粒.转化大肠杆菌BL21感受态细胞,大量培养后用IPTG诱导GST融合蛋白表达,分离纯化后采用SDS?PAGE检测CT1及其突变体蛋白的相对分子量和纯度.结果 CT1片段及其突变体融合蛋白得到了正确、大量表达,提取纯化后的CT1片段及其突变体融合蛋白具有较高的纯度.结论 成功构建了Cav1.2通道CT1片断及其突变体融合蛋白原核表达载体,获得了CT1突变体融合蛋白,为深入研究CT1片断在Cav1.2通道调节中的作用和机制奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郝丽英	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	56	146	6.0	9.0
2	赵美眯	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	26	110	5.0	9.0
3	朱彤	东北大学环境生物学教研室	52	314	10.0	14.0
4	封瑞	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	31	128	7.0	10.0
5	雷明	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	2	3	1.0	1.0
6	毛楠	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	5	3	1.0	1.0
7	王红梅	中国医科大学药学院药物毒理学教研室	7	11	2.0	3.0