杆状病毒GP64表面展示元件与L-天冬酰胺酶Ⅱ融合表达的初步试验

• 作者: 乌慧玲 刘永 吴岩 孔莉 朱珊颖 王文兵
• 来源期刊: 蚕业科学
• 学科: 医学
• 关键词: 家蚕杆状病毒 GP64表面展示系统 L-天冬酰胺酶Ⅱ 融合表达 BmN细胞
• 年，卷（期）: 2015,（4）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 677-681
• 页数: 5页
• 分类号: R979.1|Q786
• 语种: 中文
• DOI: 10.13441/j.cnki.cykx.2015.04.014

摘要

GP64是Ⅰ型杆状病毒的主要囊膜糖蛋白,利用基因重组技术在gp64中插入外源蛋白基因,二者在病毒表面融合表达活性肽或蛋白质,可以免去纯化表达产物的繁琐.L-天冬酰胺酶Ⅱ(ASP)是一种临床上广泛使用的蛋白类抗肿瘤药物,利用家蚕杆状病毒(BmNPV)GP64展示系统表面展示ASP,探讨以表面展示有ASP蛋白的出芽型病毒粒子(BV)生产抗肿瘤药物的可行性.构建重组转移载体pFastBacdual-gp64sp-asp-gp64ctd,并转化E.coli DH10BacTM,通过蓝白斑筛选获得重组杆粒DNA,将重组杆粒DNA通过脂质体转染至BmN细胞,获得了重组病毒.重组病毒大量感染BmN细胞后72 h,收集感染病毒的细胞培养液超速离心纯化BV.采用奈氏试剂法检测接种重组病毒的BmN细胞内表达融合ASP的酶活力为1 788.4U/mg;Western blot检测纯化后的BV中含融合ASP蛋白,然而BV中的ASP检测不出酶活性.试验结果提示,构建的杆状病毒GP64展示系统可以将ASP转到BV上,但产物的活性保持有待进一步研究.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王文兵		108	565	12.0	19.0
2	吴岩		22	50	4.0	6.0
3	乌慧玲		14	57	5.0	7.0
4	孔莉		3	2	1.0	1.0
5	刘永		7	24	3.0	4.0
6	朱珊颖		1	0	0.0	0.0