重组鸡β-防御素2蛋白的表达与生物学活性鉴定

• 作者: 刘胜旺 张婷婷 徐倩倩 徐杨 王秋玲 韩宗玺 马得莹 高梦莹
• 来源期刊: 东北农业大学学报
• 学科: 农学
• 关键词: 鸡 AvBD2 重组蛋白 抗菌活性
• 年，卷（期）: 2015,（8）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 56-60,108
• 页数: 6页
• 分类号: S831|Q786
• 字数: 4142字
• 语种: 中文

摘要

为探讨鸡β-防御素2(AvBD2)的生物学特性,研究将AvBD2基因克隆到原核表达载体pProEX HTa的Eco R Ⅰ和Xho Ⅰ双酶切位点上,构建重组表达质粒pProEX-AvBD2,将重组质粒转化大肠杆菌Rosetta感受态细胞,用IPTG对其菌液进行诱导表达.Tricine-SDS-PAGE电泳结果表明,His-AvBD2重组蛋白分子质量约12 ku,与预期一致.将该重组蛋白纯化后,通过菌落计数法测定其体外抗肠炎沙门氏菌、四联球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌等抑菌活性,盐离子浓度对其抗菌活性的影响及其溶血活性.结果显示,AvBD2重组蛋白对所测定的4株细菌有显著抗菌活性,高盐浓度显著降低其抗菌活性.该重组蛋白溶血活性极低.