表达猪细小病毒VP2蛋白和猪IL-18重组伪狂犬病毒的构建

• 作者: 乔涵 付朋飞 崔保安 朱前磊 王林青 王淑娟 郭晓庆 陈红英
• 来源期刊: 中国兽医学报
• 学科: 医学
• 关键词: 猪细小病毒 VP2基因 猪IL-18基因 猪伪狂犬病病毒 重组病毒
• 年，卷（期）: 2015,（9）
• 所属期刊栏目: 预防兽医学
• 页码范围: 1422-1428
• 分类号: R392
• 语种: 中文
• DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2015.09.05

摘要

为了获得表达猪细小病毒(PPV)VP2蛋白和细胞因子猪白细胞介素-18(IL-18)的重组猪伪狂犬病毒(PRV).将PPV VP2基因和猪IL-18基因分别插入到PRV转移质粒PG中,得到重组质粒PG18 VP2.利用脂质体转染法将重组转移质粒PG18-VP2与猪PRV弱毒株DNA共转染猪睾丸(ST)细胞,以EGFP荧光标记,通过5轮蚀斑筛选纯化,成功获得表达PPV VP2蛋白和猪IL-18且带EGFP标记的重组伪狂犬病毒IL18-VP2 rPRV.用重组病毒感染ST细胞,12h后在荧光显微镜下可见明亮的绿色荧光;通过RT-PCR证实感染细胞中含有PPV VP2和猪IL-18 mRNA;Western-blot试验结果显示,重组病毒能表达具有生物活性的PPV VP2蛋白和猪IL-18.重组病毒经连续20次传代后感染细胞仍能发出绿色荧光,PCR检测表明VP2及IL-18基因在重组病毒中能稳定遗传.为进一步研究表达PPV VP2蛋白和猪IL-18的重组猪伪狂犬病毒的免疫效力奠定了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	陈红英	河南农业大学牧医工程学院	168	646	12.0	16.0
2	崔保安		274	2313	25.0	33.0
3	王林青	河南农业大学牧医工程学院	12	51	3.0	7.0
5	王淑娟		22	57	4.0	6.0
8	付朋飞	河南农业大学牧医工程学院	15	50	4.0	6.0
9	乔涵	河南农业大学牧医工程学院	17	49	4.0	5.0
10	郭晓庆	河南农业大学牧医工程学院	12	45	3.0	6.0
11	朱前磊		16	18	3.0	3.0