幽门螺杆菌尿素酶B亚单位的克隆表达及纯化

• 作者: 刘丹 彭超 苏亚南 邹雪 闫东明 闫锦锦
• 来源期刊: 生物技术通报
• 关键词: 幽门螺杆菌 尿素酶B亚单位 UreB蛋白 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2015,（7）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 220-225
• 语种: 中文
• DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2015.07.034

摘要

为获得高纯度具有生物活性的尿素酶B亚单位(UreB)蛋白,利用PCR方法扩增出ureB目的基因,将其插入到pET28a载体中,构建表达质粒pET28a-ureB.将鉴定正确的质粒转入大肠杆菌中培养,通过IPTG诱导表达获得UreB蛋白.采用Q Sepharose High Performance阴离子交换层析纯化,G-25凝胶过滤层析脱盐,并通过SDS-PAGE和免疫双扩散法对UreB蛋白进行鉴定.结果表明,该蛋白相对分子质量约为64 kD,与预期结果相符,脱盐后获得的UreB蛋白纯度为98.5％;免疫双扩散法证明该蛋白具有良好的生物活性和反应特异性.最终确定的纯化工艺,达到了一步纯化即得到高纯度、具有生物活性蛋白的目的,该纯化工艺简单、有效.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	闫锦锦		3	1	1.0	1.0
2	闫东明		3	1	1.0	1.0
3	邹雪		4	1	1.0	1.0
4	刘丹		3	1	1.0	1.0
5	彭超		4	1	1.0	1.0
6	苏亚南		3	1	1.0	1.0