SUMF2基因过表达慢病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 姜晓峰 粱红艳 薛丽 那春鑫
• 来源期刊: 医学研究杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 硫酸酯酶修饰因子2 慢病毒过表达载体构建
• 年，卷（期）: 2015,（11）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 43-46
• 页数: 4页
• 分类号: R3
• 字数: 3080字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11969/j.issn.1673-548X.2015.11.012

摘要

目的 构建硫酸酯酶修饰因子2 (SUMF2)基因过表达慢病毒载体,以便进一步研究SUMF2功能.方法 针对人SUMF2 DNA序列设计带酶切位点的引物,PCR法获得目的基因片段;用Age Ⅰ和Nhe Ⅰ酶双酶切SUMF2基因片段及PLJM1-EGFP载体.用T4连接酶对两种酶切产物进行连接、PCR鉴定、测序.将阳性克隆质粒与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染293T细胞,并荧光显微镜观察EGFP的表达.结果 PCR和测序证实成功构建了SUMF2的慢病毒表达载体,病毒效价为1×108 TU/ml.结论 成功构建SUMF2-PLJM1-EGFP慢病毒载体,并在293T细胞中得到表达.