PDGF-C 3'UTR区荧光素酶报告基因载体构建

• 作者: 屈亚琦 王涛 罗年安 董瑞 贾林涛
• 来源期刊: 现代生物医学进展
• 学科: 生物学
• 关键词: 载体构建 PDGFC 双荧光素酶报告基因
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 基础研究
• 页码范围: 3801-3804
• 分类号: Q782
• 语种: 中文
• DOI: 10.13241/j.cnki.pmb.2015.20.001

摘要

目的:构建不同长度包含目的片段的PDGFC 3'UTR双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节做准备.方法:培养人乳腺癌细胞系MDA-MB-231细胞,提取腺癌细胞系MDA-MB-231细胞的基因组DNA,以提取的基因组为模板,通过PCR扩增不同长度的PDGFC 3'UTR片段,经胶回收后,将回收的目的片段插入报告基因载体SV40-pGL3中,再经转化将克隆好的载体转入细菌内扩增(先在固体培养基上扩增为菌落,然后再接种进液体细菌培养管中扩增),扩增细菌后进行质粒提取,并进行菌落PCR及双酶切鉴定,最后送公司进行基因序列检测鉴定.结果:成功构建了不同长度目的片段的PDGFC 3'UTR的双荧光素酶报告基因载体.结论:本实验构建了不同长度的PDGF-C mRNA的3'UTR区的双荧光素酶报告基因载体,为进一步研究PDGF-C mRNA的上游miRNA调节打下了基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王涛	第四军医大学生化实验室	87	599	11.0	20.0
2	贾林涛	第四军医大学生化实验室	34	179	7.0	11.0
3	董瑞	第四军医大学附属唐都医院普通外科	43	313	9.0	17.0
4	罗年安	第四军医大学附属唐都医院普通外科	7	128	3.0	7.0
5	屈亚琦	第四军医大学附属唐都医院普通外科	5	124	3.0	5.0