人β-防御素3与杀菌/通透性增加蛋白重组腺病毒载体及其转染C3H10T1/2细胞的构建

• 作者: 刘翠 张欣然 翟羽 郭希民 郭红延 钱智勇
• 来源期刊: 中国现代医学杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 腺病毒载体 人β-防御素3 杀菌/通透性增加蛋白
• 年，卷（期）: 2015,（20）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 17-22
• 页数: 6页
• 分类号: R373|Q782
• 字数: 4721字
• 语种: 中文

摘要

目的 构建人β-防御素3(hBD3)与杀菌/通透性增加蛋白(BPI)的重组腺病毒载体pAdxsi-BPI-BD3,并转染鼠胚胎间充质干细胞系(C3H10T1/2),观察融合蛋白的表达.方法 酶切原始质粒,得到BPI-BD3片段,连接到pShutde-CMV得到pShuttle-BPI-BD3,验证后将插入片段转移至pAdxsi载体构建重组腺病毒质粒,线性化后转染HEK293细胞,扩增纯化后,TCID50测定重组腺病毒滴液.pAdxsi-BPI-BD3及空载体pAdxsi(作为对照组)转染C3H10T1/2.RT-PCR、Western blot检测BPI-BD的表达;MTT法检测其对细胞增殖的影响.结果 成功构建重组腺病毒载体pAdxsi-BPI-BD3,纯化后病毒滴度达1.2×1010 pfu/ml.pAdxsi-BPI-BD3转染C3H10T1/2后,RT-PCR、Western blot结果显示,BPI-BD3融合蛋白表达成功.MTT结果显示,转染的C3H10T1/2生长无明显影响(P＞0.05).结论 成功构建重组腺病毒裁体pAdxsi-BPI-BD3,且转染C3H10T1/2后可稳定表达BPI-BD3融合蛋白,为进一步研究应用抗菌肽BPI-BD3奠定基础.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	郭红延	北京武警总医院口腔医学中心	9	20	3.0	4.0
2	刘翠	北京武警总医院口腔医学中心	4	7	1.0	2.0
3	翟羽	北京武警总医院口腔医学中心	3	2	1.0	1.0