茭草ISSR-PCR体系的优化

• 作者: 仇玉萍 吕玉凤
• 来源期刊: 中国农学通报
• 学科: 生物学
• 关键词: 茭草 ISSR 正交设计 反应体系
• 年，卷（期）: 2015,（6）
• 所属期刊栏目: 生物科学
• 页码范围: 136-141
• 分类号: Q949
• 语种: 中文

摘要

为了建立适用于茭草的ISSR-PCR反应体系,以湿地植物茭草基因组DNA为研究对象,筛选引物为UBC818,采用正交试验设计方法,建立了茭草ISSR-PCR反应体系和扩增程序.结果表明,在25此反应体系中含有1×PCR缓冲液、250 μmol/L dNTP、2.0 mmol/L MgCl2、0.5 μmol/L引物、1.0 UTaqDNA聚合酶和100 ng模板DNA最适用于茭草ISSR-PCR扩增.适宜的扩增程序为94℃5min;94℃1 min;56℃45 s;72℃90 s;35个循环;72℃10 min;4℃保存.