人乙酰肝素酶的原核表达及重组表达产物的免疫原性鉴定

• 作者: 孙爱华 张少妮 褚美芬 陈士华
• 来源期刊: 中国卫生检验杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 乙酰肝素酶 重组表达 免疫原性
• 年，卷（期）: 2015,（24）
• 所属期刊栏目: 分子诊断与基因检测
• 页码范围: 4292-4294
• 页数: 3页
• 分类号: R446.6
• 语种: 中文

摘要

目的 重组并原核表达人乙酰肝素酶(HPA),并对重组产物rHPA进行免疫原性鉴定,获得足够的乙酰肝素酶为其功能研究奠定基础.方法 利用包含HPA全长序列质粒为模板,扩增肝素酶eDNA片段,将其插入表达载体pET42a,转化到大肠杆菌BL21 DE3中,0.5 mmol/L的IPTG诱导表达.SDS-PAGE检测目的重组蛋白表达情况,Ni-NTA亲和层析法提纯rHPA,Western Blot和ELISA检测rHPA的免疫原性.结果 成功构建了人乙酰肝素酶原核表达系统,rHPA表达量为细菌总蛋白的23.4％,SDS-PAGE显示提纯后的rHPA为单一的蛋白条带.鼠抗人HPA能有效识别rHPA.结论 所构建的人乙酰肝素酶原核表达系统能高效表达rHPA,表达的产物有良好的免疫原性.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	孙爱华		112	523	11.0	15.0
2	褚美芬		26	140	7.0	11.0
3	张少妮		2	6	1.0	2.0
4	陈士华		1	0	0.0	0.0