小蓬NeMT2基因的克隆及其植物表达载体的构建

• 作者: 曾卫军 李艳红 葛风伟 赵惠新
• 来源期刊: 广西植物
• 学科: 生物学
• 关键词: 小蓬 NeMT2 RACE 序列分析 植物表达载体
• 年，卷（期）: 2016,（8）
• 所属期刊栏目: 植物遗传与育种
• 页码范围: 897-905
• 页数: 9页
• 分类号: Q786
• 字数: 6686字
• 语种: 中文
• DOI: 10.11931/guihaia.gxzw201601029

摘要

该研究利用RACE ( Rapid amplification of cDNA ends)技术从小蓬中成功分离编码金属硫蛋白( Metal-lothionein,MT)的cDNA序列,命名为NeMT2,在GenBank中登录号为KT835290。该基因全长590 bp,开放阅读框为237 bp,编码78个氨基酸,编码的氨基酸序列中含有14个半胱氨酸残基( Cys,C),呈C-C,C-X-C,C-X-X-C排列,集中分布在肽链的N端和C端,基因编码蛋白的分子量为7.6036 kD,等电点为4.71。系统发育分析表明,小蓬金属硫蛋白NeMT2与藜科的海蓬子( AEF01492)和盐穗木( AHI62953)同源性最高,其次是甜菜( XP 010667708.1)。生物信息学分析表明,金属硫蛋白NeMT2无信号肽结构,属于非跨膜亲水性蛋白；疏水性分析表明,NeMT2蛋白的35~45个氨基酸之间有较强的疏水性,其中第41位Asp具最强的疏水性(1.444)；结构预测分析该蛋白质二级结构的主要元件是无规则卷曲。通过RT-PCR对NeMT2基因的表达分析发现, NeMT2基因在铜矿区和非铜矿区的小蓬叶片中均有表达,但该基因在铜矿区小蓬叶片的表达量明显高于非铜矿区。将小蓬NeMT2基因定向克隆到植物表达载体pCAMBIA1300的35S 启动子下游,构建该基因的植物超表达载体pCAMBIA1300＋NeMT2。该研究结果为进一步研究该基因的功能和小蓬响应重金属胁迫的分子机制提供了一定基础。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	李艳红	新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室新疆师范大学生命科学学院	3	14	1.0	3.0
2	葛风伟	新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室新疆师范大学生命科学学院	3	14	1.0	3.0
3	赵惠新	新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室新疆师范大学生命科学学院	3	14	1.0	3.0
4	曾卫军	新疆特殊环境物种保护与调控生物学实验室新疆师范大学生命科学学院	2	14	1.0	2.0