蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白条件的优化研究

• 作者: 孙静 曹秋野 朴玮 李瑾 殷继永 陈頔 霍军生 马欣欣 黄建
• 来源期刊: 中国食品卫生杂志
• 学科: 医学
• 关键词: 蛋白质芯片 乳铁蛋白 优化 检测 牛乳 检测条件
• 年，卷（期）: 2016,（6）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 720-724
• 分类号: R155
• 语种: 中文
• DOI: 10.13590/j.cjfh.2016.06.007

摘要

目的 优选并确定蛋白质芯片检测牛乳中乳铁蛋白(lactoferrin,Lf)的检测条件.方法 利用蛋白质芯片技术,采用双抗夹心的方式,通过点样探针选择试验、点样一致性试验、棋盘滴定试验、浓度倍比试验、生物检测限试验及检测下限试验最终优化出针对目标蛋白的最佳检测条件.结果 最终确定以Lf鼠单抗75#为点样探针,预点样46点,46点至90点为点样一致性区段;点样探针浓度为0.5 mg/ml,检测抗体效价为1∶2 000,在0.6～ 612ng/ml之间剂量-反应关系呈现S型曲线,其线性范围在9.56 ～ 306 ng/ml之间;检测下限为1.68 ng/ml,生物检测限为3.59 ng/ml;建立了对Lf具有最佳回归系数(r =0.998)的回归方程与标准曲线.结论 此研究优化了利用蛋白质芯片技术检测Lf的试验条件,为建立定量检测Lf的蛋白质芯片平台奠定了基础.