HDAC1重组腺病毒载体的构建及鉴定

• 作者: 关方霞 张琨 程康 邢衢 马珊珊 黄团结
• 来源期刊: 郑州大学学报（理学版）
• 学科: 医学
• 关键词: 组蛋白去乙酰化酶1 腺病毒载体 脐带间充质干细胞 增殖
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 页码范围: 101-104,126
• 页数: 5页
• 分类号: R394.2
• 字数: 3122字
• 语种: 中文
• DOI: 10.13705/j.issn.1671-6841.2015259

摘要

利用Ad-Easy腺病毒表达系统构建含有人源性组蛋白去乙酰化酶1(HDAC1)基因的重组腺病毒,并检测其在脐带间充质干细胞(hUC-MSCs)中的表达及对hUC-MSCs增殖的影响.RT-PCR扩增人HDAC1ORF序列,构建pAdTrack-CMV-HDAC1重组腺病毒穿梭质粒,PmeI单切后将其转化进入E.coli BJ5183与腺病毒骨架质粒同源重组,PacI单切线性化后转染至HEK293细胞中扩增和包装pAd-HDAC1,采用空斑法鉴定病毒滴度;pAd-HDAC1感染hUC-MSCs,倒置荧光显微镜下观察荧光表达,qRT-PCR和Western Blot分别检测细胞中HDAC1在mRNA水平和蛋白水平的表达,CCK-8实验检测HDAC1高表达对hUC-MSCs增殖的影响.结果显示成功扩增人HDAC1ORF序列并构建pAd-HDAC1重组腺病毒;病毒感染后hUC-MSCs中HDAC1 mRNA和蛋白表达水平明显增高,并且促进hUC-MSCs的增殖.成功构建HDAC1高表达的腺病毒,可有效提高hUC-MSCs中HDAC1的表达并促进细胞增殖.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	关方霞	郑州大学生命科学学院	64	248	9.0	12.0
2	马珊珊	郑州大学生命科学学院	39	137	6.0	9.0
3	邢衢	郑州大学生命科学学院	10	62	5.0	7.0
4	黄团结	郑州大学生命科学学院	8	33	4.0	5.0
5	程康	郑州大学生命科学学院	4	12	2.0	3.0
6	张琨	郑州大学生命科学学院	9	61	4.0	7.0