H9N2禽流感病毒一步法双重荧光RT-PCR检测方法的建立

• 作者: 于浩 崔淑娟 彭晓旻 李明举 杨鹏 毕丽芳 王全意 由佳
• 来源期刊: 国际病毒学杂志
• 关键词: 禽流感病毒 H9N2 双重荧光RT-PCR 特异性、灵敏度 稳定性
• 年，卷（期）: 2016,（2）
• 所属期刊栏目: 论著
• 页码范围: 89-91,94
• 页数: 4页
• 字数: 3832字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3760/cma.j.issn.1673-4092.2016.02.005

摘要

目的 建立一种可同时检测禽流感病毒H9N2的HA和NA基因一步法双重荧光RT-PCR方法.方法 针对H9N2禽流感病毒的HA和NA基因保守区,设计相应的特异性引物以及探针,优化检测体系及反应条件,建立一步法双重荧光定量RT-PCR方法.对该方法的灵敏度、特异性、稳定性进行验证与评估,并对家禽粪便标本进行应用检测,以单重实时荧光RT-PCR方法作为参照,检测结果不一致的样本采用测序进行验证.结果 该方法特异性强,与H1、H3、H5、H7亚型禽流感病毒、鸡新城疫及鸡传染性支炎病毒均无交叉反应,对HA和NA基因的最低检出限分别可达50拷贝/μL和25拷贝/μL,组间与组内的变异系数在0.20 ～0.79％之间.对82份粪便标本进行检测,H9N2禽流感病毒的阳性率为8.14％ (7/82),与单重实时荧光RT-PCR法检测结果一致.结论 该方法特异性强、灵敏度高、稳定性好,可应用于临床禽流感样本的检测.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	由佳		13	35	4.0	5.0
2	杨鹏	北京北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所	6	47	4.0	6.0
3	彭晓旻	北京北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所	4	34	2.0	4.0
4	王全意	北京北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所	12	117	7.0	10.0
5	李明举		10	14	2.0	2.0
6	崔淑娟	北京北京市疾病预防控制中心传染病地方病控制所	2	3	1.0	1.0
7	于浩		1	1	1.0	1.0