长叶红砂咖啡酸-O-甲基转移酶(RtCOMT)基因的克隆及蛋白纯化

• 作者: 冯杰 张慧荣 王迎春 赵萍萍
• 来源期刊: 西北农业学报
• 学科: 生物学
• 关键词: 长叶红砂 COMT基因 原核表达 蛋白纯化
• 年，卷（期）: 2016,（10）
• 所属期刊栏目: 研究报告
• 页码范围: 1529-1535
• 页数: 7页
• 分类号: Q943.2
• 字数: 5229字
• 语种: 中文
• DOI: 10.7606/j.issn.1004-1389.2016.10.016

摘要

长叶红砂(Reaumuria trigyna)是内蒙古东阿拉善一西鄂尔多斯地区特有双子叶盐生小灌木,有极强的耐盐抗旱性,入药可以治疗湿疹、皮炎等疾病,具有一定的药用价值.咖啡酸-O-甲基转移酶(RtCOMT)是一个重要的甲基化酶,主要调控木质素合成过程中中间产物及木质素的变化.基于高通量测序结果,利用RT-PCR技术克隆获得长叶红砂COMT(RtCOMT)基因,构建RtCOMT原核表达载pET32a-RtCOMT,并将其转化大肠杆菌,重组阳性菌经IPTG诱导和SDS-PAGE电泳检测.结果表明:RtCOMT基因开放阅读框长1 023 bp,编码340个氨基酸,推测蛋白分子质量37.24 ku,理论等电点(pI)6.71,发现该基因在大肠杆菌中正常表达得到与预期大小一致的融合蛋白.采用Ni-IDA His-Bind亲和层析方法对RtCOMT重组蛋白进行纯化,体外获得目的蛋白.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	王迎春	内蒙古大学生命科学学院	64	1055	20.0	30.0
2	张慧荣	内蒙古大学生命科学学院	5	66	3.0	5.0
3	赵萍萍	内蒙古大学生命科学学院	3	5	2.0	2.0
4	冯杰	内蒙古大学生命科学学院	2	5	2.0	2.0