金黄色葡萄球菌A型肠毒素双抗体夹心ELISA检测方法的建立及应用

• 作者: 方维焕 时玉菲 王歆 章先 谢珲
• 来源期刊: 微生物学通报
• 关键词: 金黄色葡萄球菌A型肠毒素 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 生物实验室
• 页码范围: 687-694
• 语种: 中文
• DOI: 10.13344/j.microbiol.china.150416

摘要

[目的]建立一种快速、灵敏、特异的金黄色葡萄球菌A型肠毒素(Staphylococcal enterotoxinA,SEA)检测方法.[方法]以原核表达的可溶性重组SEA蛋白为免疫原,获得特异性强、亲和力高的单克隆抗体作为捕获抗体,同时制备抗SEA兔多抗血清作为检测抗体建立双抗体夹心ELISA (Double antibody sandwich ELISA,DAS-ELISA)检测方法.[结果]该方法对SEA的线性检测区间为2-128 μg/L (y=1.102x-0.07,R2=0.994),检测下限为1.89 μg/L,与SEB、SEC2和SED之间无交叉反应;鲜奶SEA人工污染试验测定回收率为94％-114％,变异系数小于10％.应用该方法对46株金黄色葡萄球菌水产品分离株和164株奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌分离株的体外培养上清进行检测,阳性率分别为4.4％和50.6％,表明SEA污染普遍存在.[结论]建立的DAS-ELISA方法特异性、灵敏度和稳定性好,为检测SEA的食源性污染提供了有效手段.

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	方维焕	浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室	103	1066	20.0	26.0
2	谢珲	浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室	2	32	2.0	2.0
3	章先	浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室	2	32	2.0	2.0
4	王歆	浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室	3	37	3.0	3.0
5	时玉菲	浙江大学动物科学学院浙江省动物预防医学重点实验室	2	32	2.0	2.0