鲤肠道小肽转运载体PepT1多克隆抗体的制备及其组织表达分析

• 作者: 卢荣华 孙君君 杨丽萍 聂国兴 郑文佳 闫潇
• 来源期刊: 中国水产科学
• 学科: 农学
• 关键词: 鲤 PepT1 原核表达 抗体效价 组织表达
• 年，卷（期）: 2016,（3）
• 所属期刊栏目: 研究论文
• 页码范围: 513-521
• 页数: 9页
• 分类号: S917
• 字数: 5850字
• 语种: 中文
• DOI: 10.3724/SP.J.1118.2016.15316

摘要

为从蛋白水平研究小肽转运载体(PepT1)在鲤(Cyprinus carpio L.)不同组织中的表达及分布规律,本研究采用PCR法获得PepT1 cDNA片段,并转化至大肠杆菌Rosetta,对目标多肽进行原核表达,将PepT1重组蛋白纯化后免疫新西兰长耳兔(Oryctolagus cuniculus),获取兔抗鲤PepT1多克隆抗体。采用ELISA检测抗体效价,免疫组化检测PepT1的组织表达情况,并用荧光实时定量PCR技术检测PepT1转录水平组织表达情况。结果显示,目标多肽分子量约为28 kD；抗体效价达到4×105。PepT1在鲤的前肠、中肠、后肠、脾、肝胰脏和肾中均有表达。肠道组织 PepT1的高表达与其主要完成食物中肽的吸收功能密切相关,且吸收部位主要集中在前肠和中肠；肾中PepT1免疫染色阳性区域也较为明显,这与肾小管基底膜存在对短肽的重吸收功能相关。此外,肝胰脏和脾PepT1也有一定量的表达,可能与这两个重要器官代谢旺盛有关。本研究制备的兔抗鲤 PepT1多克隆抗体能够有效识别鲤各组织中的PepT1蛋白,在后续研究中亦可用于其他鱼类PepT1转运蛋白的表达定位和定量研究。

作者信息

序号	姓名	单位	发文数	被引次数	H指数	G指数
1	聂国兴	河南师范大学水产学院	165	1275	18.0	30.0
2	卢荣华	河南师范大学水产学院	28	58	5.0	7.0
3	杨丽萍	河南师范大学水产学院	11	23	3.0	4.0
4	闫潇	河南师范大学水产学院	14	23	3.0	4.0
5	孙君君	河南师范大学水产学院	7	33	3.0	5.0
6	郑文佳	河南师范大学水产学院	4	11	1.0	3.0